Bok tamo! Kao anIPTG reagensdobavljača, često me pitaju o razlikama između IPTG-a i drugih induktora. Pa sam mislio da dublje zaronim u ovu temu i podijelim ono što znam.
IPTG reagens
Šifra proizvoda: BM-2-5-091
Engleski naziv: IPTG
CAS BR.: 367-93-1
MF: C9H18O5S
MW: 238,3
EINECS: 206-703-0
Proizvođač: BLOOM TECH Wuxi Factory
Tehnološka služba: R&D Dept.-2
Dostava: Dostava kao drugi neosjetljivi naziv kemijskog spoja.
Nudimo IPTG reagens, pogledajte sljedeću web stranicu za detaljne specifikacije i informacije o proizvodu.
Proizvod:https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/api-researching-only/iptg-reagent-cas-367-93-1.html
Prvo, shvatimo što je induktor. U svijetu molekularne biologije, induktor je molekula koja regulira ekspresiju gena. Veže se na represorski protein, sprječavajući ga da se veže na operatorsku regiju DNA. To omogućuje RNA polimerazi da prepisuje gene nizvodno od operatora, što dovodi do proizvodnje specifičnih proteina.
IPTG reagens: Kratki pregled
IPTG ili izopropil β-D-1-tiogalaktopiranozid je dobro poznati sintetski induktor. Obično se koristi u laboratoriju za induciranje ekspresije gena pod kontrolom lac operona. Lac operon je skup gena u E. coli koji su uključeni u metabolizam laktoze. Kada se IPTG doda bakterijskoj kulturi, on oponaša djelovanje alolaktoze (prirodnog induktora lac operona). Budući da bakterije ne metaboliziraju IPTG, on ostaje u mediju i kontinuirano inducira ekspresiju gena.
Jedna od glavnih prednosti IPTG-a je njegova stabilnost. Za razliku od nekih prirodnih induktora, IPTG se ne razgrađuje pomoću bakterija, što znači da možete održavati dosljednu razinu indukcije tijekom duljeg razdoblja. Ovo je super korisno kada provodite pokuse koji zahtijevaju stalnu proizvodnju određenog proteina.
Usporedba IPTG s drugim induktorima
Laktoza
Laktoza je prirodni induktor lac operona. Kada je laktoza prisutna u okolišu, E. coli će je preuzeti i pretvoriti u alolaktozu, koja se zatim veže za lac represor i omogućuje ekspresiju gena. Velika razlika između laktoze i IPTG je u tome što je laktoza supstrat za metabolizam bakterija. Kako bakterije troše laktozu, razina indukcije se s vremenom smanjuje.
Drugi aspekt je trošak. Laktoza je puno jeftinija od IPTG. Ako provodite opsežne eksperimente u kojima je cijena glavni čimbenik, laktoza bi mogla biti privlačnija opcija. Međutim, varijabilnost u razinama indukcije zbog metabolizma može biti nedostatak. Na primjer, ako trebate proizvesti visokokvalitetan, konzistentan uzorak proteina, IPTG je vjerojatno bolji izbor.
arabinoza
Arabinoza je induktor araBAD operona u E. coli. Slično lac operonu, araBAD operon uključen je u metabolizam šećera (u ovom slučaju arabinoze). Kada je arabinoza prisutna, ona se veže na AraC protein, koji zatim aktivira ekspresiju gena iz araBAD promotora.
Jedna ključna razlika između arabinoze i IPTG je regulatorni mehanizam. Sustav araBAD je strože reguliran u usporedbi s lac operonom. To znači da u nedostatku arabinoze, postoji vrlo malo bazalne ekspresije ciljnih gena. Nasuprot tome, lac operon može imati neku nisku bazalnu ekspresiju čak i bez induktora.
Arabinozu također metaboliziraju bakterije, pa se, poput laktoze, razine indukcije mogu mijenjati tijekom vremena. Ali ako trebate sustav s vrlo čvrstom regulacijom, sustav araBAD-arabinose mogao bi biti prikladniji od sustava lac-IPTG.
ramnoza
Ramnoza je još jedan induktor na bazi šećera koji se koristi u sustavima ekspresije bakterijskih gena. Inducira ekspresiju gena pod kontrolom rhaBAD operona. Slično arabinozi i laktozi, ramnozu metaboliziraju bakterije.
Prednost ramnoze je u tome što često osigurava čvršće regulirani sustav u usporedbi s laktozom. Također se može koristiti u kombinaciji s drugim induktorima za stvaranje složenijih obrazaca ekspresije gena. Međutim, IPTG još uvijek ima prednost u pogledu stabilnosti i dosljednih razina indukcije.
Primjene i razmatranja
U mnogim istraživačkim laboratorijima, IPTG je glavni induktor za osnovne eksperimente ekspresije proteina. Njegova stabilnost i predvidljivost čine ga idealnim za proizvodnju rekombinantnih proteina. Na primjer, ako pokušavate pročistiti protein za strukturne studije, potrebna vam je stalna opskrba proteinom, a IPTG vam može pomoći da to postignete.
S druge strane, ako radite na projektu s ograničenim proračunom ili ako ste zainteresirani za proučavanje prirodne regulacije ekspresije gena, drugi induktori poput laktoze, arabinoze ili ramnoze mogli bi biti prikladniji.
Također je važno uzeti u obzir organizam domaćina. Različite bakterije mogu različito reagirati na različite induktore. Neki sojevi E. coli mogu imati mutacije u lac operonu ili drugim regulatornim sustavima, što može utjecati na učinkovitost induktora.
Neke druge kemikalije u istraživanju
Osim induktora, postoje mnoge druge kemikalije koje se koriste u istraživanju. Na primjer,1,3-dimetilpentilamin CAS 105-41-9je sintetička kemikalija koja se koristi u istraživanju API-ja. Još jedan je5-fluorocitidin CAS 2341-22-2, koji također ima svoje primjene u području istraživanja. IBilirubin u prahu CAS 635-65-4je još jedna važna kemikalija u svijetu istraživanja.
Zašto odabrati naš IPTG reagens?
Kao dobavljač, ponosni smo što nudimo visokokvalitetni IPTG reagens. Naš proizvod je čist i pouzdan, osigurava dosljedne rezultate u vašim eksperimentima. Shvaćamo važnost posjedovanja stabilnog induktora za vaše istraživanje i zato smo se potrudili pronaći i ponuditi najbolji IPTG na tržištu.
Bilo da ste mali istraživački laboratorij ili velika biotehnološka tvrtka, možemo zadovoljiti vaše potrebe. Naše cijene su konkurentne i nudimo fleksibilne opcije pakiranja koje odgovaraju različitim količinama upotrebe.
Ako ste zainteresirani saznati više o našem IPTG reagensu ili ako imate bilo kakvih pitanja o induktorima općenito, ne ustručavajte se kontaktirati. Tu smo da vam pomognemo da napravite najbolji izbor za vaše istraživanje. Obratite nam se da započnemo razgovor o vašim potrebama nabave i radimo zajedno na postizanju vaših istraživačkih ciljeva.
Reference
Miller, JH (1972). Eksperimenti u molekularnoj genetici. Laboratorij Cold Spring Harbor.
Schleif, R. (2010). Regulacija L-arabinoznog operona Escherichie coli. Godišnji pregled genetike, 44, 47-63.
Elowitz, MB, Levine, AJ, Siggia, ED, i Swain, PS (2002.). Stohastička ekspresija gena u jednoj stanici. Znanost, 297(5584), 1183-1186.