Janus Green B, engleskog naziva Janus Green, molekularne formule C30H31ClN6, CAS 2869-83-2, zeleni je čvrsti prah na sobnoj temperaturi i tlaku. Čini se da je topiv u vodi, ali slabo topljiv u alkoholnim organskim otapalima. Ima visoku topljivost u vodi, posebno kada se otopi u vrućoj vodi i izgleda plavo. Također je slabo topljiv u alkoholnim otapalima. Ovo svojstvo omogućuje mu brzu difuziju i bojenje u biološkim uzorcima. To je specifično živo sredstvo za bojenje koje se može koristiti za živo bojenje mitohondrija, bojenje gljivica i protozoa, bojenje presjeka embrija, kao i za redoks indikatore i aditive za galvanizaciju bakra. Ima dobru primjenu u osnovnim istraživačkim poljima kao što su biokemija i fluorescentne boje. Njegova molekularna struktura sadrži azo boje, što ga čini učinkovitim organskim bojilom. Pozitivni naboj u njegovoj molekularnoj strukturi također ga čini određenom vrijednošću primjene u materijalima za galvanizaciju.

|
|
|
|
Kemijska formula |
C30H31ClN6+ |
|
Točna misa |
510 |
|
Molekularna težina |
511 |
|
m/z |
510 (100.0%), 511 (32.4%), 512 (32.0%), 513 |
|
Elementarna analiza |
C, 70,51; H, 6,11; N, 16,44; Cl, 6,94 |

Janus Green B, kao važno biološko bojilo, ima široku primjenu u više područja.

1. In vivo bojenje mitohondrija
Naj-poznatija upotreba je kao mitohondrijsko specifično živo sredstvo za bojenje. Mitohondriji su "tvornice energije" u stanicama, odgovorne za proizvodnju energetskih molekula kao što je ATP za održavanje staničnih životnih aktivnosti. Može posebno obojiti mitohondrije, čineći ih plavo-zelenima pod -mikroskopom velike snage, dok je citoplazma gotovo bezbojna. Ova karakteristika bojenja omogućuje istraživačima jasno promatranje distribucije, morfologije i količine mitohondrija u stanicama, što je od velike važnosti za proučavanje funkcije, metabolizma i odnosa s bolestima mitohondrija.
2. Bojenje gljiva i protozoa
Osim za bojenje mitohondrija, može se koristiti i za bojanje gljiva i protozoa. Gljive i protozoe važni su objekti u biološkim i medicinskim istraživanjima, a njihova morfologija, struktura i fiziološka svojstva presudna su za razumijevanje životnih procesa i mehanizama bolesti. Njegova svojstva bojenja olakšavaju promatranje i identifikaciju ovih sićušnih organizama pod mikroskopom, pružajući snažnu podršku povezanim istraživanjima.


3. Bojenje presjeka embrija
U razvojnoj biologiji i embriološkim istraživanjima, bojenje presjeka embrija važno je sredstvo razumijevanja procesa razvoja embrija i strukturnih promjena. Može se koristiti za bojenje rezova embrija kako bi se istraživačima pomoglo u promatranju i analizi strukture staničnih tkiva i morfoloških karakteristika embrija u različitim razvojnim fazama. To je od velike važnosti za razumijevanje regulatornih mehanizama embrionalnog razvoja, nastanka genetskih bolesti i problema reproduktivnog zdravlja.
4. Redox indikator
Također ima funkciju indikatora-redukcije oksidacije. U kemijskim reakcijama, oksidacijska i redukcijska stanja tvari često su popraćena promjenama boje. Pod različitim redoks stanjima, pokazivati će različite boje i stoga se može koristiti kao indikator za redoks reakcije. Zbog ove karakteristike ima potencijalnu vrijednost primjene u područjima kao što su kemijska analiza, praćenje okoliša i prehrambena industrija.


Polazeći od 4-amino-N, N-dietilanilina ili p-fenilendiamina (koji sadrži N,N-dietilanilin), metilen violet 3RAX dobiva se ciklizacijom s anilinom u prisutnosti oksidansa. Naknadno,Janus Green Bpriprema se diazotiranjem i reakcijom spajanja.
Polazni materijal: Pod pretpostavkom da koristimo 4-amino-N, N-dietilanilin kao glavni početni materijal. Slučaj p-fenilendiamina (koji sadrži N, N-dietilanilin) može zahtijevati dodatne korake za odvajanje ili sintetiziranje željenog N, N-dietilsupstituiranog p-fenilendiamina, ali ovdje se fokusiramo na slučaj jednog početnog materijala.
Cilj: ciklizirati 4-amino-N, N-dietilanilin s anilinom ili drugim prikladnim spojevima kako bi nastala benzoheterociklička struktura slična metilen violet 3RAX. Prvo, 4-amino-N, N-dietilanilin se prevodi u međuprodukt koji se lakše ciklizira nekim sredstvima kao što je acilacija, kondenzacija, itd., a zatim se intermedijer ciklizira s anilinom.
Primjer reakcije (nije izravna, samo za ilustraciju):
Reakcija aciliranja (stvaranje amidnog međuprodukta): 4-amino-N, N-dietilanilin reagira s acil kloridom ili anhidridom da proizvede odgovarajući amid.
4-amino-N,N-dietilanilin+acil klorid → amidni intermedijer+HCl
Prstenasta reakcija (hipoteza): amidni intermedijer se ciklizira s anilinom pod katalizatorom i/ili uvjetima zagrijavanja.
Amid intermedijer+anilin → intermedijer sličan metilen violetu 3RAX
Svrha: osigurati da intermedijer sadrži aromatske primarne amine za naknadne reakcije diazotiranja.
Primjer reakcije (ako je intermedijer već aromatski primarni amin, preskočite ovaj korak):
Ako intermedijer nije aromatski primarni amin, možda će ga trebati pretvoriti u aromatski primarni amin redukcijom, hidrolizom ili drugim reakcijama.
Međuproizvod koji nije primarni amin + redukcijski agens/sredstvo za hidrolizu → intermedijer aromatskog primarnog amina
Cilj: Pretvorba intermedijera aromatskih primarnih amina u diazonijeve soli.
Kemijska jednadžba:
Intermedijer aromatskog primarnog amina+dušičasta kiselina+kiselina → diazonijeva sol+voda
Napomena: Reakcija diazotizacije obično se provodi na niskim temperaturama (kao što je ispod 0 stupnjeva C) i pod kiselim uvjetima kako bi se spriječilo raspadanje diazonijevih soli.
Cilj: Spajanje diazonijevih soli s prikladnim fenolnim ili aromatskim aminskim spojevima u Jianna Green B.
Kemijska jednadžba (primjer): diazonijeve soli+fenolni ili aromatski aminski spojevi → C30H31ClN6+nus-proizvodi
Napomena: Reakcije spajanja obično se izvode u alkalnim uvjetima kako bi se pospješilo stvaranje produkata spajanja. Odabir odgovarajućih fenolnih ili aromatskih aminskih spojeva ključan je za dobivanje ciljnog proizvoda, Jianna Green B.
Dodatni koraci: pročišćavanje i naknadna-obrada
Cilj: Izolirati i pročistiti Jianna Green B iz reakcijske smjese.
Metoda: Ovo može uključivati tehnike poput ekstrakcije otapalom, kristalizacije, rekristalizacije, kromatografskog odvajanja (kao što je kromatografija na stupcu, tankoslojna kromatografija, HPLC itd.).
Pažnja: koraci pročišćavanja i post{0}}obrade ključni su za dobivanje ciljanih proizvoda visoke -čistoće. U laboratoriju će ove korake možda trebati ponoviti više puta kako bi se optimizirao prinos i čistoća.
U biološkim eksperimentima,Janus Green Bnaširoko se koristi kao uobičajeno živo sredstvo za bojenje za promatranje morfologije i distribucije mitohondrija. Njegove jedinstvene karakteristike bojenja omogućuju jasno razlikovanje mitohondrija pod mikroskopom, što ga čini važnim alatom u istraživanju stanične biologije. U nastavku će biti objašnjeno kako pripremiti 1% kvalitetnu frakciju Jianna Green B otopine boje. Ovaj proces ne uključuje samo precizno vaganje i otapanje kemijskih reagensa, već i pažljivo razmatranje faktora kao što su temperatura i odabir otapala kako bi se osiguralo da je konačna otopina boje stabilna i učinkovita.
|
|
|
|
|
Eksperimentalna priprema
Materijali i reagensi
Jianna Green B prah: Osigurajte da je kupljeni Jianna Green B visoke čistoće i bez nečistoća, što je osnova za pripremu visoko-kvalitetnih otopina boja.
Fiziološka otopina: Fiziološka otopina, također poznata kao 0,9% otopina natrijevog klorida, često se koristi kao otapalo u biološkim eksperimentima za smanjenje oštećenja stanica jer je njezin osmotski tlak sličan onom ljudskih stanica. U ovom eksperimentu, fiziološka otopina korištena je kao medij za otapanje Jianna Green B.
Mjerni cilindar: Koristi se za točno mjerenje fiziološke otopine.
Čaša: Koristi se za otapanje praha Jianna Green B.
Magnetska mješalica (opcija): Koristi se za ubrzavanje procesa otapanja i osiguravanje da je prah ravnomjerno raspršen u otapalu.
Mjerač temperature: Koristi se za praćenje i kontrolu temperature tijekom procesa otapanja.
Elektronska vaga: Koristi se za precizno vaganje praha Jianna Green B.
Odmjerna tikvica (po izboru): Ako se želi veća preciznost, za određivanje volumena može se koristiti odmjerna tikvica. Ali u ovoj jednostavnoj metodi pripreme mogu se izravno koristiti čaša i mjerni cilindar.
Smeđa staklena boca: Koristi se za čuvanje pripremljene otopine boje Jianna Green B. Smeđa boca može spriječiti utjecaj svjetla na otopinu boje i održati njenu stabilnost.
Sigurnosna zaštita
Nosite laboratorijske kute: Zaštitite odjeću od kemijske kontaminacije.
Nosite rukavice: Spriječite izravan kontakt kože s kemijskim reagensima.
Nosite zaštitne naočale: Kako biste spriječili prskanje otopine u oči.
Rad u napi: Osigurajte cirkulaciju zraka u laboratoriju i smanjite nakupljanje štetnih plinova.
Pripremni koraci
Točno izvažite 0,5 g praha Jianna Green B koristeći elektroničku vagu. Imajte na umu da je vagu potrebno kalibrirati prije vaganja kako bi se osiguralo točno vaganje.
Pažljivo ulijte izvagani prah Jianna Green B u čistu čašu kako biste spriječili da prah leti.
Točno izmjerite 50 ml fiziološke otopine pomoću graduiranog cilindra. Imajte na umu da prilikom mjerenja mjerni cilindar treba postaviti na stabilnu površinu, tako da linija vizure bude u razini s najnižom točkom razine tekućine kako bi se osiguralo točno mjerenje.
Polako ulijte izmjerenu fiziološku otopinu u čašu koja sadrži prašak Jianna Green B. Imajte na umu da ga treba polako ulijevati uz stijenku čaše kako bi se izbjeglo prskanje tekućine ili stvaranje velike količine pjene.
Lagano promiješajte otopinu staklenim štapićem kako biste pomogli otopiti prašak Jianna Green B. Ako uvjeti dopuštaju, za miješanje se može koristiti magnetska mješalica kako bi se poboljšala učinkovitost otapanja.
Tijekom procesa miješanja obratite pažnju na promjenu boje otopine. Kako se Jianna Green B otapa, otopina bi postupno trebala postati tamnozelena ili plavo-zelena.
Zbog ograničene topljivosti Jianna Green B na sobnoj temperaturi, kako bi se poboljšala učinkovitost otapanja, čaša se može zagrijati u vodenoj kupelji na 30-40 stupnjeva Celzijusa. Imajte na umu da temperatura ne smije biti previsoka tijekom zagrijavanja kako bi se izbjeglo oštećenje kemijske strukture Jianna Green B ili pretjerano isparavanje otapala.
Tijekom procesa zagrijavanja nastavite miješati otopinu sve dok se prašak Jianna Green B potpuno ne otopi i otopina postane jednolika i prozirna.
Nakon otapanja provjerite boju i prozirnost otopine. Ako u otopini ima neotopljenih čestica ili nejednake boje, potrebno je nastaviti s miješanjem ili odgovarajućim zagrijavanjem dok se problem ne riješi.
Ako je potrebno prilagoditi koncentraciju otopine, količina fiziološke otopine ili praha Jianna Green B može se na odgovarajući način povećati ili smanjiti prema stvarnoj situaciji. Ali u ovoj metodi pripreme, točno smo izvagali reagens prema masenom udjelu od 1%, tako da obično nisu potrebna dodatna podešavanja.
Ulijte pripremljenu otopinu boje Jianna Green B u smeđu staklenu bocu i čvrsto je zatvorite kako biste spriječili kontaminaciju i isparavanje.
Označite bocu s nazivom, koncentracijom, datumom pripreme i imenom korisnika otopine boje za buduću upotrebu i upravljanje.
Mjere predostrožnosti
Točno vaganje:
Osiguravanje točnog mjerenja zdravstvenog zelenog B praha i fiziološke otopine ključ je za pripremu visoko-kvalitetnih otopina boja.
01
Kontrola temperature:
Tijekom procesa zagrijavanja, temperaturu treba strogo kontrolirati kako bi se izbjegli štetni učinci na kvalitetu otopine boje uzrokovani pretjerano visokim ili niskim temperaturama.
02
Adekvatno miješanje:
Miješanje je ključni korak u osiguravanju da je zeleni B prah ravnomjerno otopljen u fiziološkoj otopini i treba ga nastaviti sve dok otopina ne postane jednolika i prozirna.
03
Siguran rad:
Strogo se pridržavajte sigurnosnih propisa u laboratoriju tijekom cijelog procesa pripreme kako biste osigurali osobnu sigurnost i sigurnost eksperimentalnog okruženja.
04
Pravovremena upotreba:
Dugotrajno skladištenje pripremljene otopine boje ipak može dovesti do smanjenja njezinog učinka bojenja ili drugih kemijskih promjena. Preporučljivo je koristiti ga što je prije moguće nakon pripreme kako bi se osigurao najbolji učinak bojenja.
05
FAQ
1. Što je Janus Green B?
Janus Green B je umjetno sintetizirana osnovna boja-na bazi fenazina, koja se obično koristi u biološkom bojenju (kao što je živo bojenje mitohondrija) i kao indikator-redukcije oksidacije.
2. Koje su glavne svrhe?
Uglavnom se koristi u biološkim eksperimentima:
- Bojanje mitohondrija uživo (budući da ga sustav unutarnje membrane mitohondrija može vratiti u bezbojno stanje, otkrivajući njegovu redoks aktivnost).
- Detekcija staničnog disanja (kao indikator-redukcije oksidacije, plavo označava oksidirano stanje, a bezbojno stanje reduciranja).
- Također se može koristiti kao boja za svilu i kožu u industriji.
3. Koji je princip bojenja?
U mitohondrijima, Janus Green B se reducira u bezbojni produkt pomoću enzima na unutarnjoj membrani (kao što je citokrom c oksidaza) unutar mitohondrija; nakon što napusti mitohondrije, kisik ga ponovno -oksidira do plave boje. Ova reverzibilna redoks reakcija omogućuje specifično indiciranje mitohondrijske aktivnosti.
4. Na što treba obratiti pozornost pri korištenju?
- Potrebno je kontrolirati koncentraciju boje i vrijeme (obično 0,01%-0,02%) kako bi se izbjeglo prekomjerno bojenje koje može ometati aktivnost stanica.
- Za neke vrste stanica učinak bojenja možda neće biti zadovoljavajući. Uvjete treba optimizirati.
- Čuvajte u tamnom i zatvorenom spremniku kako biste spriječili raspadanje.
Popularni tagovi: janus green b cas 2869-83-2, dobavljači, proizvođači, tvornica, veleprodaja, kupovina, cijena, rasuto, na prodaju








