5-Jodocitidinje nukleotidna molekula koja sadrži jod, koja se široko koristi u području biomedicine. U nastavku će biti predstavljeno nekoliko sintetskih metoda 5-jodocitidina.
(1) Pirimidinska metoda
Ova metoda sinteze prvo reagira pirimidin s ozonom kako bi se dobio 5-oksopirimidin, zatim reagira s metil jodidom da bi se dobio 5-jodo-2'-deoksiuridin, i na kraju ga reducira s 1,{{5 }}diklor-2-propanol Reakcija daje 5-jodocitidin. Produkt sintetiziran ovom metodom ima visoku čistoću, ali ima mnogo koraka i zahtjevi za reakcijske uvjete su relativno visoki. Konkretni koraci su sljedeći:
Korak 1: Pripremite potrebne sirovine
Prvo je potrebno pripremiti sljedeće sirovine:
- 5-aminoketoza (5-amino-2,3,5-tri-O-acetil- -D-ribofuranoza)
- 5-jodouracil (5-jodouracil)
- Trikloroctena kiselina
- Otopina natrijevog hidroksida (NaOH)
- Vodik ili vodikov plin (H2)
- difosfor pentoksid
- Etanol (etanol)
-dimetilacetamid (DMA)
Korak 2: Priprema 5-jodocitidina:
- Korak 2.1
5-aminoketoza i 5-jodouracil reagirali su u otopini trikloroctene kiseline na sobnoj temperaturi nekoliko sati. Ovaj korak je ključni korak 5-jodocitidina.
- Korak 2.2
Obradite reaktante da ih oslobodite od trikloroctene kiseline. Reakcijska smjesa dodana je kap po kap na filter papir obložen pirofosfornim anhidridom. Krutina je isprana uzastopnim otopinama natrijevog hidroksida, vode, etanola i diacetamida. Nakon ispiranja, krutina je osušena da se dobije 5-jodocitidin.
Korak 3: Zaključak:
Pirimidinska metoda je učinkovita metoda za pripremu 5-jodocitidina. Reakcija 5-aminoketoze i 5-jodouracila u trikloroctenoj kiselini dovodi do konačne pripreme 5-jodocitidina nakon nekoliko koraka.
(2) Metoda derivatizacije aldonske kiseline:
Metodom se prvo dobiva 5-kloro-2'-deoksiuridin esterificiranjem 5-klorouridina s 3,4,6-tri-O-acetilglukonskom kiselinom, a zatim se izvodi reakcija jodiranja da se dobije 5-jodo- 2'-deoksiuridin. Konačno, 5-jodocitidin se dobiva reakcijom redukcije. Metoda ima prednosti jednostavnog rada i visoke čistoće proizvoda. Slijede detaljni koraci:
1. Sinteza 5-hidroksimetil-2'-deoksicitidina (5-HmdC): suspendirati 2'-deoksicitidin u 1,4-dioksanu, dodati acetil klorid i aluminijev triklorid, reagirati Proizvodi se 5-acetoksimetil-2'-deoksicitidin. Zatim je 5-acetoksimetil-2'-deoksicitidin otopljen u metanolu i dodani su THF, voda i NaBH4 da se dobije 5-HmdC.
2. Sinteza 5-jodocitidina: Otopite 5-HmdC u bromovodiku i octenoj kiselini, zagrijavajte 6 sati da se dobije 5-jodocitidin.
3. Sinteza 5-jodocitidin derivata aldonske kiseline: Otopiti 5-jodocitidin u fosfatnom puferu. Dodati aldonsku kiselinu i ostaviti reakciju 2 sata. Reakcija je zatim ugašena s metil formatom i trietilsilil kloridom. Reakcijska smjesa je filtrirana i taloženjem je dobiven derivat 5-jodocitidin aldonske kiseline.
4. Pročišćavanje: Dobiveni produkt treba pročistiti, a tekućinska kromatografija visoke učinkovitosti (HPLC) može se koristiti za odvajanje i pročišćavanje.
Gore navedeni su detaljni koraci 5-metode derivatizacije jodocitidin aldonske kiseline. Metoda se može koristiti za pripremu derivata 5-jodocitidin aldonske kiseline visoke čistoće i može zadovoljiti različite potrebe u područjima biomedicine i farmaceutskih istraživanja.
(3) Metoda anhidrida kiselog šećera:
Ova metoda prvo reagira 2',3'-di-O-metil glukozid s fumarnom kiselinom kako bi se dobila 2',3'-di-O-metiluridin sol, a zatim je pretvara u 5'-jod-2', 3'-di-O-metiluridin sol, i konačno 5-jodocitidin se dobiva uklanjanjem metilne skupine. Metoda ima blage reakcijske uvjete i sintetske proizvode visoke čistoće, ali zahtijeva sirovine relativno visoke čistoće. Ima prednosti jednostavnog rada i visokog prinosa. Slijede detaljni sintetički koraci.
1. Sinteza 5-jodo-2'-deoksicitidilata (CIDC ester)
(1) Otopiti 5-jodocitidin (1.0g, 3,73 mmol) u 4 mL bezvodnog trietilamina i ohladiti do 0 stupnjeva u kupelji s ledenom vodom;
(2) Dietil karbonat (0.70 mL, 4.0 mmol) je dodan u otopinu, a dimetilformamid (DMF) (0.50 mL, 6.9 mmol) je polako dodan kap po kap, te je reagirao 30 minuta;
(3) Dodati natrijev hidroksid (0.50g, 12.5mmol) i nastaviti miješati 30 minuta;
(4) Dodati acetonitril (10 mL) i ventilirati u atmosferi dušika 10 minuta;
(5) Dodati tetrabutilbakar(II) hidroksid (0.61g, 2.50 mmol) i nastaviti miješati, te reagirati 1 sat;
(6) Dodati anhidrid octene kiseline (0.53 mL, 5.0 mmol), nastaviti miješati i reagirati 2 sata.
2. Sinteza 5-jodocitidina
(1) Dodati dibutil fosfat (2 mL, 10.0 mmol) u ohlađenu reakcijsku otopinu i miješati 1 sat;
(2) Dodati kloroform (20 mL), dobro promiješati i isprati vodom;
(3) Natrijev persulfat i kolona silikagela u kojoj je organska faza osušena ispiru se u koloni napunjenoj na koloni:
(4) Koncentrirajte organsku fazu centrifugom da nastane 5-jodocitidin.
Gore navedeno je kiselinska bezvodna metoda 5-jodocitidina i njezini detaljni koraci. Tijekom procesa sinteze potrebno je obratiti pozornost na sigurnost kemijskih tvari i sigurnosne propise laboratorija. Tijekom rada moramo slijediti ispravne laboratorijske operativne postupke, ojačati svijest o sigurnosti, obaviti dobar posao u zaštiti laboratorijske sigurnosti i osigurati sigurnost laboratorijskog osoblja.
(4) Metoda bromiranja:
Ovom metodom dobiva se 5-bromuracil reakcijom uracila s fosfornim tribromidom, a zatim se podvrgava reakciji metilacije da se dobije 5-bromo-2'-deoksiuridin. Katalitički se reducira upotrebom natrijevog hidroksida i amonijevog persulfata da bi se dobio 5-jodocitidin. Metoda ima manje koraka reakcije, ali je proizvod niže čistoće. Detaljni koraci su sljedeći:
1. Priprema tert-butil izocijanata: Uzmite izocijanat, dodajte aceton i trietilamin, upuhujte dušik i refluksirajte 2 sata. Reakcijska otopina je ostavljena na sobnoj temperaturi. Filtrirajte talog kako biste uklonili anorganske soli i ponovno isparite da biste konačno dobili tert-butil izocijanat
2. Pretvorite 5-klorocitidin u 5-jodocitidin: Reagirajte 5-klorocitidin, jodovodičnu kiselinu i octenu kiselinu u metanolu kako biste ga pretvorili u 5-jodocitidin. U isto vrijeme, jodid i višak kalijevog jodida također se mogu koristiti za reakciju u vodi, dok se koloidno srebro dodaje za pretvaranje 5-klorocitidina u 5-jodocitidin.
3. Dodajte tert-butil izocijanat 5-jodocitidinu za reakciju: Nakon dobivanja 5-jodocitidina, otopite ga u otopini natrijevog hidroksida i dodajte tert-butil izocijanat. Vrijeme reakcije bilo je 2 sata na sobnoj temperaturi. Nakon završetka reakcije, zakiseli se octenom kiselinom, a dobiveni produkt se doda bikarbonatnom diestru za ekstrakciju.
4. Pročišćavanje 5-jodocitidina: Pročistite 5-jodocitidin da biste dobili konačni proizvod 5-jodocitidin.
Ukratko, koraci metode bromiranja 5-jodocitidina relativno su komplicirani i potrebno ih je pažljivo svladati i vježbati.
Ukratko, postoji mnogo načina za sintetiziranje 5-jodocitidina, a različite metode mogu se odabrati prema stvarnim potrebama za dobivanje 5-jodocitidina visoke čistoće.