Iptg prah CAS 367-93-1

Iptg prahmože se koristiti za djelovanje lokalnog anestetika, primjenjuje se kao sredstvo za širenje za post-olakšanje bolova u ranama i čireva. Molekularno biološki reagensi koji se obično koriste u probiru plavih i bijelih mrlja i ekspresiji proteina izazvanoj IPTG-om u bakterijama. IPTG, puni naziv izopropil- - D-tiogalaktozid, CAS 367-93-1, molekulska formula C9H18O5S, molekulska masa 384,37 Daltona, spada u spojeve malih molekula. Bijeli ili gotovo bijeli prah, slabo topiv u vodi, ali bolje topiv u organskim otapalima. U molekulama postoje ionske skupine, pa imaju određeni stupanj vodljivosti u vodi. Stabilan na sobnoj temperaturi, ali se lako razgrađuje u uvjetima visoke temperature ili jakih kiselina i lužina. Nema očitog mirisa, ali se tijekom uporabe može javiti blagi miris organskih spojeva. To je često korišten induktor koji se koristi za induciranje ekspresije proteina u bakterijama. U medicinskoj dijagnostici, IPTG može poslužiti kao fluorescentna sonda ili kromogeno sredstvo za otkrivanje specifičnih molekula ili tkiva u uzorcima. Kombinirajući se s ciljnim molekulama, IPTG može generirati fluorescentne signale ili promjene boje, pružajući snažnu podršku dijagnostici bolesti.

Iptg prah,Fizički parametri, Mp. : 114 ~ 121 stupanj C, Opis upotrebe, Uobičajeni reagensi za molekularnu biologiju, koji se obično koriste u plavo-bijelom skriningu i IPTG-induciranoj ekspresiji proteina u bakterijama. , Specifikacije pakiranja , 1G, 5G, 25G, 100G, 1KG , Uvjeti skladištenja

2-8 stupnjeva u hladnjaku, zaštićeno od svjetlosti, Opis opasnosti, Šifra opasnosti: Xi, Razina rizika: R36 / 37 / 38, Sigurnosna razina: S23-24 / 25-36.

IPTG se obično koristi u eksperimentima kloniranja koji trebaju inducirati aktivnost -galaktozidaze. Često se koristi u kombinaciji s X-Gal ili Bluo-Gal za plavo-bijeli pregled rekombinantnih bakterijskih kolonija, koje Chemicalbook može inducirati da eksprimiraju lac operon u E. coli. IPTG se veže na lacI represorski protein i mijenja njegovu konformaciju kako bi spriječio inhibiciju lacZ gena kodiranog -galaktozidazom.

IPTG, puni naziv izopropil- -D-tiogalaktozid je često korišteni induktor koji se naširoko koristi za indukciju i regulaciju ekspresije proteina. Zbog svoje jedinstvene strukture i funkcije, IPTG se obično priprema korištenjemIptg prahmetode sinteze u laboratoriju.

Iptg prahpuni naziv izopropil- - D-tiogalaktozid često je korišten induktor koji se naširoko koristi za indukciju i regulaciju ekspresije proteina.

1. Indukcija ekspresije proteina:

IPTG igra važnu ulogu u indukciji ekspresije proteina. To je naširoko korišten induktor koji može učinkovito inducirati ekspresiju specifičnih gena u bakterijama, čime se u kratkom vremenskom razdoblju dobiva željeni ciljni protein. Njegov mehanizam djelovanja je da se veže za lacI gen bakterije, inhibira aktivnost njegovog transkripcijskog regulatornog proteina, čime otvara lac operon bakterije i pokreće ekspresiju ciljnih gena. Kada se koriste operoni laktoze kao promotori za ekspresiju proteina, potrebni su induktori, a IPTG može djelovati kao analog laktoze za induciranje ekspresije galaktozidaze u Escherichia coli. Stanice ga ne mogu iskoristiti za postizanje održive ekspresije. IPTG se veže za lac|proizvodi, uzrokujući konformacijske promjene od lacO, čime se aktivira transkripcija. Ova inducibilna regulacija transkripcije postala je često korišten element u konstrukciji vektora ekspresijskog sustava E. coli.

2. Regulacija ekspresije gena:

 

IPTG ima važnu ulogu u regulaciji ekspresije gena. Kao važan eksperimentalni reagens, igra važnu ulogu u regulaciji ekspresije gena i eksperimentima prekomjerne ekspresije proteina. Kontroliranjem vremena dodavanja i koncentracije IPTG-a može se postići regulacija ekspresije ciljanog proteina. Ovaj regulatorni učinak temelji se na vezanju IPTG na lac|proizvodi u operonima laktoze, mijenjajući njihovu konformaciju, ostavljajući tako lacO i dalje aktivirajući transkripciju. Ovaj inducibilni mehanizam regulacije transkripcije čini IPTG od velikog značaja u istraživačkim poljima kao što su funkcija gena, interakcije proteina i probir lijekova.

3. Kristalizacija proteina:

 

U eksperimentima kristalizacije proteina, IPTG se koristi kao induktor za poticanje kristalizacije proteina. Njegov mehanizam djelovanja je promjena konformacije proteina vezanjem na hidrofobne regije u proteinima, čime se potiče agregacija i kristalizacija između proteinskih molekula. Ovaj proces agregacije i kristalizacije je reverzibilan, tako da se kristalizacija proteina može potaknuti dodavanjem IPTG-a ili se kristali proteina mogu otopiti uklanjanjem IPTG-a.

U eksperimentima kristalizacije proteina, IPTG se obično dodaje u otopinu proteina kao konačna koncentracija od 1 mM. Ova niska koncentracija IPTG može izbjeći pretjeranu indukciju proteina, čime se postižu bolji učinci kristalizacije. U isto vrijeme, IPTG također može poslužiti kao molekularni pratilac koji pomaže u ispravnom savijanju i agregaciji proteina, čime se dobivaju ujednačeniji proteinski kristali.
Treba napomenuti da IPTG ne potiče kristalizaciju proteina u svim slučajevima. Neki proteini nisu osjetljivi na IPTG ili zbog svoje inherentne strukture i svojstava nisu prikladni za kristalizaciju, potrebna je eksperimentalna validacija i optimizacija za različite proteine ​​kako bi se odredili optimalni uvjeti i metode kristalizacije.

Citotoksičnost

 

Toksičnost za prokariotske stanice

Iako se IPTG obično koristi za induciranje ekspresije gena u prokariotskim stanicama, visoke koncentracije IPTG mogu imati toksične učinke na prokariotske stanice. Istraživanje je pokazalo da kada je koncentracija IPTG previsoka, može ometati normalne metaboličke procese unutar stanica. Na primjer, može utjecati na energetski metabolizam stanica, ometati putove kao što su glikoliza i ciklus trikarboksilne kiseline, što dovodi do smanjenja unutarstanične proizvodnje ATP-a i utječe na rast i proliferaciju stanica. Osim toga, visoke koncentracije IPTG također mogu oštetiti integritet stanične membrane, povećati njezinu propusnost, dovesti do istjecanja unutarstaničnih tvari i omogućiti štetnim tvarima iz izvanstaničnog okoliša da uđu u stanicu, uzrokujući tako staničnu smrt. Eksperimenti su otkrili da kada se Escherichia coli uzgaja u mediju koji sadrži visoke koncentracije IPTG, stopa rasta bakterija značajno usporava i broj održivih bakterija postupno opada s produljenjem vremena uzgoja. To ukazuje da visoke koncentracije IPTG-a imaju određeni inhibitorni i ubijajući učinak na Escherichiu coli.

Toksičnost za eukariotske stanice

Osim za prokariotske stanice, IPTG također može biti toksičan za eukariotske stanice. Postoje određene razlike u strukturi i funkciji između eukariotskih i prokariotskih stanica, ali IPTG ipak može utjecati na normalne fiziološke funkcije eukariotskih stanica različitim putovima. S jedne strane, IPTG može interferirati s putevima prijenosa signala unutar eukariotskih stanica. Transdukcija signala unutar stanica igra ključnu regulatornu ulogu u procesima kao što su rast, diferencijacija i apoptoza. IPTG može promijeniti intenzitet i smjer prijenosa signala interakcijom s određenim signalnim molekulama unutar stanica, čime utječe na normalne fiziološke aktivnosti stanica.

Toksičnost za eukariotske stanice

S druge strane, IPTG može inducirati odgovor na oksidativni stres u eukariotskim stanicama. Oksidativni stres odnosi se na neravnotežu između unutarstanične oksidacije i antioksidativne aktivnosti, što dovodi do povećanja proizvodnje reaktivnih kisikovih vrsta (ROS). Prekomjerni ROS može napasti biomolekule kao što su DNA, proteini i lipidi unutar stanice, uzrokujući stanično oštećenje i funkcionalno oštećenje. Istraživanja su otkrila da pod određenim uvjetima IPTG tretman eukariotskih stanica značajno povećava unutarstanične razine ROS-a, popraćeno smanjenjem vitalnosti stanica i povećanjem stope apoptoze. Ovo sugerira da IPTG može inducirati odgovor na oksidativni stres i djelovati toksično na eukariotske stanice.

Popularni tagovi: iptg prah cas 367-93-1, dobavljači, proizvođači, tvornica, veleprodaja, kupnja, cijena, rasuto, za prodaju