IPTG, CAS 367-93-1, kemijska struktura sastavljena od izopropila - Sastoji se od D-tiogalaktozida i fosfatnih skupina. Među njima, - D-tiogalaktozid je analog galaktoze, u kojem atom sumpora zamjenjuje atom kisika. Ova posebna struktura glikozida omogućuje IPTG-u da se veže za DNA i inducira ekspresiju gena. IPTG ima nisku topljivost u vodi, ali se može dobro otopiti u fiziološkoj otopini i fosfatnom puferu. Kiseo je s pKa vrijednošću od 4,5, što je povezano s fosfatnom skupinom u njegovoj molekularnoj strukturi. Nije lako kristalizirati u čistoj vodi, ali može formirati kristale u otopinama visoke koncentracije ili kada se dodaju drugi spojevi. Zbog svoje sposobnosti da inducira ekspresiju bakterijskih proteina, IPTG je osjetljiv na određene mikroorganizme. Na primjer, neke bakterije mogu prestati rasti ili umrijeti nakon izlaganja IPTG-u.
(Veza proizvoda 1: https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/api-researching-only/iptg-reagent-cas-367-93-1.html ）
(Veza proizvoda 1: https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/api-researching-only/iptg-powder-cas-367-93-1.html ）
Enzimska sinteza IPTG-a je metoda koja koristi enzime za kataliziranje reakcije galaktoze i uridin trifosfata za proizvodnju izopropilnih skupina- - Metoda za D-tiogalaktozid. Slijede detaljni koraci i kemijske jednadžbe ove metode:
1. Pripremni rad:
Pripremite potrebne reagense i opremu, uključujući galaktozu, uridin trifosfat, enzime, pufer, reakcijske posude, regulatore temperature itd.
Dodajte galaktozu i uridin trifosfat u određenom omjeru u reakcijsku posudu.
Dodajte odgovarajuću količinu enzima i pufera za održavanje pH stabilnosti reakcijskog sustava.
Stavite reakcijsku posudu u regulator temperature i namjestite odgovarajuću reakcijsku temperaturu.
2. Reakcijski proces
2.1 Ravnomjerno izmiješajte reakcijski sustav na odgovarajućoj temperaturi.
2.2 Održavajte temperaturu i pH stabilnosti reakcijskog sustava i nastavite miješati.
2.3 Uzorkovanje i ispitivanje izopropila u redovitim intervalima- - Proizvodnja D-tiogalaktozida.
2.4 Prilagodite dozu enzima i vrijeme reakcije na temelju rezultata ispitivanja kako biste dobili najbolju proizvodnju izopropilne skupine- - D-tiogalaktozida.
3. Kemijska jednadžba
C20H31N3O12 + C3H7ClN2O2S + UDP → C8H6Br4O2 + C10H15N5O10P2 + C3H7N
Među njima ATP predstavlja adenozin trifosfat, UDP predstavlja uridin difosfat, a Pi predstavlja anorganski fosfor. Ova kemijska jednadžba predstavlja stvaranje izopropilnih skupina iz galaktoze i uridin trifosfata pod djelovanjem enzima - - D-tiogalaktozida i ADP, kao i Pi.
4. Odvajanje i pročišćavanje
Nakon što je reakcija završena, reakcijska otopina se filtrira ili centrifugira kako bi se uklonile neizreagirane galaktoza, uridin trifosfat i druge nečistoće.
Upotrebom odgovarajućih tehnika odvajanja i pročišćavanja, kao što su ionska izmjena, kromatografija itd., za daljnje pročišćavanje izopropil- - D-tiogalaktozida.
Provedite ispitivanje kvalitete, kao što je tekućinska kromatografija visoke učinkovitosti, masena spektrometrija itd., kako biste osigurali da kvaliteta proizvoda zadovoljava zahtjeve.
5. Sažetak
Metoda enzimatske sinteze IPTG ima visoku selektivnost, prinos i čistoću, kao i prihvatljivost za okoliš i visoku sigurnost. Kod ove metode vrsta, koncentracija, pH vrijednost, temperatura i drugi uvjeti enzima imaju značajan utjecaj na rezultate reakcije, te je potrebna precizna kontrola i podešavanje. Osim toga, koraci odvajanja i pročišćavanja također su ključni za osiguranje kvalitete i čistoće proizvoda. U praktičnom radu potrebno je izvršiti prilagodbe i optimizacije u skladu s određenim okolnostima kako bi se dobila najbolja izopropilna skupina- - Proizvodnja i kvaliteta D-tiogalaktozida.
Metoda višekomponentne reakcije IPTG je reakcija koja koristi sudjelovanje više komponenti za sintezu izopropil- - metode za D-tiogalaktozid. Slijede detaljni koraci i kemijske jednadžbe ove metode:
1. Pripremni rad
Pripremite potrebne reagense i opremu, uključujući galaktozu, uridin trifosfat, adenozin trifosfat, natrijev tiosulfat, enzime, pufer, reakcijske posude, regulatore temperature itd.
Dodajte galaktozu, uridin trifosfat, adenozin trifosfat i natrijev tiosulfat u određenom omjeru u reakcijsku posudu.
Dodajte odgovarajuću količinu enzima i pufera za održavanje pH stabilnosti reakcijskog sustava.
Stavite reakcijsku posudu u regulator temperature i namjestite odgovarajuću reakcijsku temperaturu.
2. Reakcijski proces
2.1 Ravnomjerno izmiješajte reakcijski sustav na odgovarajućoj temperaturi.
2.2 Održavajte temperaturu i pH stabilnosti reakcijskog sustava i nastavite miješati.
Tijekom procesa reakcije potrebno je obratiti pozornost na promatranje napredovanja reakcije, pravodobno prilagođavanje količine enzima i vremena reakcije kako bi se dobila najbolja proizvodnja izopropilne skupine- - D-tiogalaktozida.
3. Kemijska jednadžba
C20H31N3O12 + C3H7ClN2O2S + C9H14N2O12P2 + C10H15N5O10P2 → C8H6Br4O2 + C3H7N
Među njima, ATP predstavlja adenozin trifosfat, UDP predstavlja uridin difosfat, ADP predstavlja adenozin difosfat, a Pi predstavlja anorganski fosfor. Ova kemijska jednadžba predstavlja stvaranje izopropilnih skupina iz galaktoze, uridin trifosfata i adenozin trifosfata pod djelovanjem enzima- - D-tiogalaktozida i Pi.
4. Odvajanje i pročišćavanje
Nakon što je reakcija završena, reakcijska otopina se filtrira ili centrifugira kako bi se uklonila neizreagirana galaktoza, uridin trifosfat, adenozin trifosfat i druge nečistoće.
Upotrebom odgovarajućih tehnika odvajanja i pročišćavanja, kao što su ionska izmjena, kromatografija itd., za daljnje pročišćavanje izopropil- - D-tiogalaktozida.
Provedite ispitivanje kvalitete, kao što je tekućinska kromatografija visoke učinkovitosti, masena spektrometrija itd., kako biste osigurali da kvaliteta proizvoda zadovoljava zahtjeve.
5. Sažetak
Metoda višekomponentne reakcije IPTG koristi prednosti višestrukih komponenti koje zajedno sudjeluju u reakciji, uz visoku selektivnost, prinos i čistoću. U ovoj metodi, uz glavne sirovine kao što su galaktoza, uridin trifosfat i enzimi, dodaju se i pomoćne komponente kao što su adenozin trifosfat i natrijev tiosulfat za pospješivanje reakcije i poboljšanje kvalitete proizvoda. Osim toga, koraci odvajanja i pročišćavanja također su ključni za osiguranje kvalitete i čistoće proizvoda. U praktičnom radu potrebno je izvršiti prilagodbe i optimizacije prema specifičnim okolnostima kako bi se dobila najbolja izopropilna skupina- - Proizvodnja i kvaliteta D-tiogalaktozida. U isto vrijeme treba obratiti pozornost na kontrolu uvjeta reakcije kao što su temperatura, pH vrijednost i doza enzima kako bi se postigao najbolji učinak reakcije.