Agarozni prahje organska tvar kemijske formule c24h38o19. To je čestica ili prah bijele ili žute boje poput gela, koji je linearni polimer, a osnovna struktura je 1,3-povezana - D-galaktoza i 1,4-povezana 3,6-endoeter-l-galaktoza naizmjenično su povezane.
Agar pektin je heterogena smjesa sastavljena od mnogo manjih molekula. Agaroza se općenito zagrijava na iznad 90 stupnjeva kako bi se otopila u vodi, a kada temperatura padne na 35-40 stupnjeva, formira dobar polučvrsti gel, što je glavna značajka i osnova njezine različite upotrebe. Učinak agaroznog gela obično se izražava jačinom gela. Što je veća čvrstoća, to je bolja izvedba gela.
Agarozni prahse dobiva iz polisaharida crvenih algi, a njegova glavna komponenta je uglavnom laktoza, od čega je oko 70% agaroza i 30% razgranati lanac agaroza.
Agaroza ima linearnu strukturu, s ponovljenim disaharidnim jedinicama koje naizmjenično tvore D-galaktoza i 3,6-dehidrirana galaktoza beta-1,4 i alfa-1,3.
Ekstrahirajte razgranatu agarozu iz -1, s tri veze koje razdvajaju drugi lanac. Tvar ekstrahirana iz morske trave vrućom vodom sadrži oko 40% agara.
Komercijalni agar (obično se naziva agar) obično je u obliku tankih listova ili labavih užadi i obično se koristi kao jestiva žvakaća guma, sredstvo za pakiranje lijekova ili medij za bakterijsku kulturu.
Čista agaroza često se koristi kao polu{0}}čvrsti nosač u biokemijskim laboratorijima, za elektroforezu, kromatografiju i druge tehnike, za odvajanje i analizu biomolekula ili malih molekula.
Agarozni prahje polisaharid ekstrahiran iz morske trave i glavna je komponenta agara. Od svog otkrića naširoko se koristi u mnogim područjima zbog svojih jedinstvenih fizičkih i kemijskih svojstava, kao što su sposobnost formiranja gela, toplinska stabilnost, kemijska stabilnost i biokompatibilnost. Slijedi detaljno objašnjenje njegove svrhe:
Primjena u biomedicinskim istraživanjima
Elektroforeza u agaroznom gelu jedna je od najčešće korištenih tehnika razdvajanja i analize u molekularnoj biologiji. Kao medij za gel elektroforezu, agaroza ima prednosti velike veličine pora, širokog raspona odvajanja i jednostavnog rada. U procesu elektroforeze biološke makromolekule poput DNA, RNA ili proteina migriraju kroz pore agaroznog gela pod djelovanjem električnog polja. Zbog razlika u naboju, veličini i obliku različitih molekula, njihova brzina migracije u gelu je različita, čime se postiže razdvajanje.
Elektroforeza u agaroznom gelu naširoko se koristi u kloniranju gena, analizi genske ekspresije i detekciji genskih mutacija. Obično se koristi kao potpora ili matrica u kulturi stanica. Zbog svoje izvrsne biokompatibilnosti i kemijske stabilnosti, agaroza može osigurati stabilno okruženje za rast stanica. Na primjer, u eksperimentu formiranja kolonija s mekim agarom, agaroza se koristi za pripremu polu-čvrstog medija kulture za otkrivanje sposobnosti stanica za stvaranje kolonija, što je od velikog značaja za procjenu stupnja maligne transformacije stanica.
Osim toga, agaroza se također može kombinirati s drugim biomaterijalima za pripremu kompozitnih materijala za skele za upotrebu u inženjerstvu tkiva i regenerativnoj medicini. Agarozni gel također ima važnu ulogu u imunodifuziji i imunoelektroforezi. U ovim tehnologijama, agarozni gel, kao medij reakcije antigena i antitijela, može formirati jasne precipitacijske linije ili prstenove, koji se mogu koristiti za otkrivanje i analizu prisutnosti i koncentracije antigena ili antitijela. Veličina pora i svojstvo naboja agaroznog gela mogu utjecati na brzinu difuzije i učinkovitost vezanja antigena i antitijela, tako da se eksperimentalni uvjeti mogu optimizirati podešavanjem koncentracije i vrste agaroze.
Primjena u eksperimentima molekularne biologije
Elektroforeza u agaroznom gelu ne može se koristiti samo za odvajanje DNK i RNK, već se može kombinirati i s drugim tehnologijama kako bi se postiglo njihovo pročišćavanje. Na primjer, u procesu ekstrakcije DNK, elektroforeza u agaroznom gelu može se koristiti za otkrivanje cjelovitosti i čistoće DNK, a zatim se ciljni segment DNK može odvojiti od gela rezanjem i obnavljanjem gela. Ova metoda ima prednosti jednostavnog rada i visoke stope oporavka. U eksperimentima hibridizacije nukleinske kiseline, agarozni gel može se koristiti kao nosač čvrste faze za fiksiranje DNA ili RNA sondi na gelu, a zatim hibridizirati s označenom ciljanom nukleinskom kiselinom.
Detekcijom prisutnosti i intenziteta hibridizacijskih signala može se odrediti prisutnost i koncentracija ciljnih nukleinskih kiselina. Veličina pora i svojstvo naboja agaroznog gela mogu utjecati na učinkovitost vezivanja probe i ciljane nukleinske kiseline, tako da se uvjeti hibridizacije mogu optimizirati podešavanjem koncentracije i vrste agaroze. Lančana reakcija polimerazom (PCR) jedna je od najčešće korištenih tehnika u molekularnoj biologiji za umnožavanje DNA. U analizi PCR produkata elektroforeza u agaroznom gelu jedna je od najčešće korištenih metoda. Odvajanjem PCR proizvoda putem elektroforeze, može se otkriti veličina i čistoća amplificiranih fragmenata, čime se utvrđuje je li PCR reakcija uspješna i postoje li ne-specifični problemi amplifikacije.
Primjena u biokemijskoj analizi
Iako je veličina pora agaroznog gela relativno velika, nije prikladan za odvajanje malih molekularnih proteina, ali se ipak može koristiti za odvajanje i pročišćavanje proteina u nekim slučajevima. Na primjer, u preparativnoj gel elektroforezi, agarozni gel se može koristiti za odvajanje i pročišćavanje proteina s većom molekularnom težinom.
Osim toga, agaroza se također može kombinirati s drugim materijalima za pripremu kompozitnog gela za proširenje raspona odvajanja i poboljšanje učinkovitosti odvajanja. U nekim eksperimentima određivanja aktivnosti enzima, agarozni gel može se koristiti kao nosač za imobilizaciju enzima. Imobilizacija enzima na agaroznom gelu može održati aktivnost i stabilnost enzima i olakšati odvajanje i oporavak enzima od reaktanata. Ova metoda ima široku primjenu u području enzimskog inženjerstva.
Primjena u mikrobiologiji
Agaroza se obično koristi kao koagulant u medijima za uzgoj mikroba. U usporedbi s agarom, agaroza ima veću čistoću i manji sadržaj nečistoća, što je čini prikladnijom za uzgoj mikroba. Kada pripremate čvrsti medij za kulturu, otopite agarozu u vrućoj vodi, zatim dodajte druge hranjive tvari i antibiotike te ohladite da nastane čvrsti medij za kulturu.
Ova vrsta medija kulture može pružiti stabilno okruženje za rast mikroorganizama, olakšavajući njihovu izolaciju, pročišćavanje i identifikaciju. U mikrobiološkim identifikacijskim eksperimentima, agarozni gel se može koristiti za pripremu specifičnih identifikacijskih medija. Na primjer, kada se identificiraju crijevne bakterije, medij za kulturu agaroze koji sadrži specifične šećere može se koristiti za razlikovanje različitih vrsta bakterija promatranjem njihove fermentacije šećera. Osim toga, agarozni gel se također može koristiti za pripremu biokemijskih reakcijskih medija za mikroorganizme kako bi se otkrile njihove metaboličke karakteristike i enzimske aktivnosti.
Proces proizvodnje agaroze može se podijeliti u četiri dijela: prethodna obrada, ekstrakcija, obrada DEAE celulozom i dehidracija.
Prethodno obrađene praškaste sirovine izravno se suše na 80C 1/2 h. trake i blok sirovine se operu vodom, izrežu na male komadiće i peku u.
Ekstrakcija: nakon nekoliko sati miješanja i ekstrakcije otopinom miješanog estera natrijevog acetata octene kiseline, uklonite vodu usisavanjem, isperite, zatim promiješajte i ekstrahirajte puferskom otopinom natrijevog karbonata natrijevog bikarbonata nekoliko sati, a zatim pumpajte, filtrirajte i isperite vodom.
Agar gel ekstrahiran otopinom pufera otopi se u 4% otopinu zagrijavanjem s vodom, a zatim se doda DEAE celuloza za miješanje 3-4 h uz čuvanje topline, a zatim centrifugira. Filtrat se sakupi i filtrira kako bi se dobila bijela otopina u koloidnom stanju.
Dehidracija: nakon zagrijavanja bijelog filtrata, dodajte 95% etanol brzo uz miješanje sve dok ne bude očite precipitacije, ohladite na sobnu temperaturu, izlijte otopinu gornjeg sloja, isperite i osušite talog kako bi se dobio proizvod, uz iskorištenje od 71%.
Oporaba reagensa Oporaba DEAE celuloze: nakon centrifugiranja, talog se prokuha s vodom, filtrira na svilenoj tkanini od 100 mesh, ponovi nekoliko puta dok filtrat ne postane bistar, zatim se ispere s 0,5 mol/1 HCl, 0,5 mol/1 NaOH i vodom, te osuši. Stopa oporavka je 95%. Frakcija na 80 C prikupljena je izravnom destilacijom etanolne vodene otopine dobivene iz Yichun vodene otopine Zatim dodajte kruti natrijev klorid do zasićenja i nastavite s destilacijom. 70% se može puniti. Nakon što natrijev klorid u boci ispari, također se može puniti pomoću ventila.
Agarozni prahobično se zagrijava na iznad 90 stupnjeva C da se otopi u vodi. Kada temperatura padne na 35-40 stupnjeva C, formirat će dobar polučvrsti gel, što je ujedno i njegova glavna karakteristika i osnova za razne namjene. Učinak agaroznog gela obično se izražava jačinom gela. Što je veća koncentracija, to je bolji učinak gela. Gel agaroze je uzrokovan postojanjem vodikove veze. Svaki čimbenik koji može uništiti vodikovu vezu može dovesti do uništenja gela. Agaroza je hidrofilna i gotovo potpuno bez nabijenih skupina. Rijetko uzrokuje denaturaciju i adsorpciju na osjetljive biomolekule. Idealan je inertni nosač.
Tijekom pripreme agaroze potrebno je što je više moguće ukloniti agarozni pektin, inače može doći do vrlo male količine sulfata i piruvata koji zamjenjuju ionizirane skupine u agarozi, što može dovesti do elektroosmoze (EEO) i utjecati na kretanje čestica. Sadržaj sulfata u visoko{1}}kvalitetnoj agarozi relativno je nizak, obično ispod 0,2%, a njezin je elektroosmotski učinak relativno mali, obično ispod 0,13. Zato je agar puno skuplji od agara.
Godine 1937. Araki je prvi izolirao agar iz agara.
Hjertin je tek 1961. prvi put otkrio izvrsna svojstva agaroze, koja je privukla sve veću pozornost i započela industrijsku proizvodnju. Agaroza se široko koristi u kliničkim ispitivanjima, biokemijskim analizama i odvajanju biomolekula.
Agarozni prah osnovni je alat u molekularnoj biologiji i biotehnologiji. Široko se koristi u gel elektroforezi, afinitetnoj kromatografiji, imunodifuziji, imunoelektroforezi i drugim područjima.
Njegove jedinstvene karakteristike, poput jednostavnosti upotrebe, multifunkcionalnosti, niske toksičnosti i isplativosti, čine ga nezamjenjivom komponentom u laboratorijskim istraživanjima.
Unatoč ograničenjima ograničene razlučivosti i lomljivosti, najnoviji napredak u tehnologiji agar gela, uključujući gelove visoke-razlučivosti, gotove gelove i mikrofluidne uređaje na bazi agara, proširio je njihovu praktičnost i poboljšao njihovu izvedbu.
Sa stalnim napretkom znanstvenih istraživanja, agarozni prah će nedvojbeno i dalje biti vrijedan i bitan reagens u kutiji s alatima molekularne biologije i biotehnologije.
FAQ
Što je agaroza i koja je njena svrha?
Elektroforeza u agaroznom gelu pokazala se učinkovitim i učinkovitim načinom odvajanja nukleinskih kiselina. Visoka čvrstoća gela agaroze omogućuje rukovanje gelovima s niskim postotkom za odvajanje velikih fragmenata DNA.
Što je agaroza i agar?
Agaroza je polisaharid koji se ekstrahira iz morskih algi (npr. crvenih algi), a njegova glavna komponenta je poligalaktoza. Agar se sastoji od agaroze i agar pektina zajedno i pročišćava se da bi se dobila agaroza. Agaroza je linearni polimorf, dok je agar pektin heterogena smjesa mnogo manjih molekula.
Što je značenje agaroze?
Agaroza se definira kao polisaharid velike -molekularne- mase ekstrahiran iz morskih crvenih algi, posebno agarocita roda Rhodophyceae, koji stvara gelove idealne za stanične studije i gel elektroforezu zbog svoje biokompatibilnosti i svojstava termo-reverzibilnog geliranja.
Koja je glavna svrha agaroznog praha?
Koristi se uglavnom za gel elektroforezu, agaroza ima i druge primjene kao što je gel filtracijska kromatografija i afinitetno pročišćavanje. Njegova najčešća uporaba je u pripremi agaroznih gelova, gdje veličina pora ovisi o koncentraciji agaroze.
Popularni tagovi: agarozni prah cas 9012-36-6, dobavljači, proizvođači, tvornica, veleprodaja, kupovina, cijena, rasuto, na prodaju