Propidium jodid prah, tamno crveni kristalni, čistoće veće ili jednake 95% od strane HPLC, topljivog u vodi, obično je korišteno nuklearno fluorescentno sredstvo. Kao analogna etidij bromida, može se ugraditi između baza kako bi se postiglo vezanje s DNK. Stabilan na sobnoj temperaturi i tlaku, to je aromatski spoj male molekule. Može se koristiti za otkrivanje stanične apoptoze, analizu staničnog ciklusa i istraživanje bakterijske aktivnosti. Ali u većini slučajeva njegova je upotreba ograničena na fiksne ili infiltrirane stanice. Ako se susreću žive stanice, žive ćelije će ih aktivno eliminirati, pa se za procese propusnosti i fiksacije obično odabiru alkohol ili aldehidni reagensi. Aldehidi i alkoholi često su nespojivi s fluorescentnim proteinima i određenim površinskim markerima, tako da benzaldehid može biti prikladniji izbor.
|
Kemijska formula |
C27H34I2N4 |
|
Točna masa |
668.09 |
|
Molekularna masa |
668.41 |
|
m/z |
668.09 (100.0%), 669.09 (29.2%), 670.09 (4.1%), 669.08 (1.5%) |
|
Elementarna analiza |
C, 48.52; H, 5.13; I, 37.97; N, 8.38 |
|
|
|
Skladištenje i topljivost
|
skladištenje |
|
|
|
Informacije o topljivosti |
Preporučuju se H2O: 5 mg/ml (7,48 mm), sonicijacija i grijanje do 60 stupnjeva. DMSO: 6,68 mg/ml (10 mm), preporučuje se sonicijacija. |
1. Izrada stanične apoptoze i nekroze
(1) Može slobodno prodrijeti u mrtve ili oštećene stanične membrane, vezati se na DNK i emitirati crvenu fluorescenciju, koja se koristi za identificiranje i kvantificiranje mrtvih i nekrotičnih stanica.
(2) U protočnoj citometriji obično se koristi za razlikovanje živih stanica, apoptotičkih stanica i nekrotičnih stanica.
2. Analiza ciklusa
(1) Nakon čvrstog vezanja na DNK, njegov intenzitet fluorescencije proporcionalan je sadržaju DNK.
(2) mjerenjem sadržaja DNK u stanicama pomoću protočne citometrije može se provesti analiza staničnog ciklusa, uključujući razlikovanje između faze G0/G1, S faze i G2/M faze.
3. Bojenje jezgara
(1) obično se koristi za fluorescentno bojenje staničnih jezgara, posebno u histološkim, citološkim i patološkim studijama.
(2) Može se koristiti za promatranje morfologije, veličine i količine staničnih jezgara.
4. Istraživanje na bakterijskoj aktivnosti
(1) Ponekad se koristi za istraživanje bakterijske aktivnosti, ali pažnju treba posvetiti smetnji izvanstaničnih nukleinskih kiselina (ENA).
(2) U nekim se slučajevima može koristiti i u kombinaciji s drugim bojama za preciznije procjenu bakterijske aktivnosti.
5. Indikacija integriteta membrane u protočnoj citometriji
(1) Ne može ući u normalne žive stanice, ali može prodrijeti u mrtve ili oštećene stanične membrane.
(2) Stoga se u protočnoj citometriji često koristi kao pokazatelj integriteta stanične membrane.
6. Ostale aplikacije
(1) Također se može koristiti za nuklearno bojenje u studijama kao što su hibridizacija in situ i imunohistokemija.
(2) U nekim se slučajevima može koristiti i za otkrivanje promjena u propusnosti stanične membrane.
Ostale upotrebePropidium jodid prahU staničnim eksperimentima uključuju:
Ispitivanje vitalnosti stanica:
Obično se koristi za otkrivanje vitalnosti stanica jer ne može prodrijeti u staničnu membranu živih stanica, ali može prodrijeti u staničnu membranu oštećenih ili mrtvih stanica, veže se na stanične nukleinske kiseline i emitiraju crvenu fluorescenciju kako bi razlikovali žive i mrtve stanice.
01
Sigurnost:
U usporedbi s nekim drugim fluorescentnim bojama kao što je EB (etidij bromid), relativno je sigurniji jer je EB poznati snažni kancerogeni mutagen
02
Istraživanje stanične apoptoze:
Često se koristi u kombinaciji s drugim bojama kao što je aneksin V za otkrivanje različitih faza stanične apoptoze. Aneksin V u kombinaciji s FITC -om može označiti rane apoptotske stanice, dok može označiti kasne apoptotske i nekrotične stanice.
03
Otkrivanje fragmentacije DNA:
U kasnoj fazi stanične apoptoze može se koristiti za otkrivanje fragmentacije DNK, što je karakteristična promjena stanične apoptoze.
04
TUNEL metoda:
Može se koristiti u eksperimentima s TUNEL (terminalni deoksinukleotidil -transferaza posredovana DUTP Nick End) kako bi se otkrila prekidi niza DNK tijekom stanične apoptoze.
05
Analiza staničnog ciklusa:
Može se koristiti za analizu staničnog ciklusa u protočnoj citometriji, identificirajući različite faze staničnog ciklusa mjerenjem promjena u sadržaju DNK.
06
Kromosomski i DNK markeri:
Koristi se za označavanje kromosoma ili DNK, promatranje i analizu procesa poput replikacije, transkripcije i popravka DNK.
07
Oznaka organela:
Može se koristiti za označavanje i vizualizaciju organela poput mitohondrija i lizosoma u stanicama na specifičnim valnim duljinama.
08
Primjene neuroznanosti:
Koristi se u neuroznanosti za označavanje neurona i sinapsa, promatranje prijenosa neuronskih signala i tako dalje.
09
Analiza ekspresije gena
Može kvantitativno analizirati razinu ekspresije gena i njihovu distribuciju u stanicama označavanjem produkata ekspresije gena.
10
1. Prodornost membrane:
Propidium jodid prahNe može prodrijeti u netaknutu staničnu membranu, ali može umanjiti stanično jezgro kroz staničnu membranu mrtvih stanica i apoptotske stanice u kasnom stadiju. Ova karakteristika čini je idealnom bojom za razlikovanje živih i mrtvih stanica.
2. Poboljšanje intenziteta fluorescencije:
Nakon vezanja nukleinskom kiselinom, intenzitet fluorescencije može se povećati za 20-30 puta, a maksimalna valna duljina pobude prebacuje se na crveni pojas za oko 30-40 nm, dok se maksimalna valna duljina emisije prebacuje u plavu traku za oko 15 nm, to čini vrlo osjetljivim tijekom otkrivanja.
3.Spektralne karakteristike:
Njegova maksimalna valna duljina pobude/emisije postaje 535/617 nm, što čini dobru diskriminaciju u multi - fluorescentnoj analizi boje, posebno ako se koristi u kombinaciji s drugim fluorescentnim bojama.
4. Povezivanje s DNK i RNA:
Može se vezati na RNA i zahtijeva liječenje nukleazom kako bi se razlikovala DNK od bojenja RNA
To pruža pogodnost za proučavanje RNA.
5.Compatibilnost:
Nudimo razne komponente mjenjača, uključujući pljuskove, valjkaste lance, zupčanike, spojnice, stalke, glavčine, remenice, rukave konusa, sjedala s ležajevima i još mnogo toga.
6. Sigurnost:
U usporedbi s nekim drugim fluorescentnim bojama kao što je EB (etidij bromid), relativno je sigurniji jer je EB poznati snažni kancerogeni mutagen.
7.
Prikladno za različite eksperimentalne tehnike kao što su fluorescentna mikroskopija, konfokalna mikroskopija, protočna citometrija i analiza analiza fluorescencije.
8.ekološko prijateljski:
Njegov otpad može se izravno obraditi bez izazivanja zagađenja okolinom, što ispunjava zahtjeve modernih znanstvenih istraživanja za zaštitu okoliša.
nevaljana reakcija
Propidium jodid prah(PI) je fluorescentna boja koja se široko koristi u istraživanjima stanične biologije. Njegova jezgra je označiti mrtve ili oštećene stanice ugradnjom crvene fluorescencije (valna duljina pobude 535 nm, valna duljina emisije 617 nm) između baznih parova dvolančane DNK. Zbog svoje nemogućnosti prodrije u žive stanične membrane, PI je postao klasični alat za razlikovanje živih i mrtvih stanica, a široko se koristi u poljima kao što su protočna citometrija, fluorescentna mikroskopija i otkrivanje apoptoze. Međutim, kao kemijski reagens, PI prah može predstavljati rizik za zdravlje ljudi i okoliš ako se koristi nepravilno ili neadekvatno zaštićen.
Nuspojave povezane s kontaktom kože
Izravni kontakt između PI praha ili njegove otopine i kože može uzrokovati iritantne reakcije, očitovane kao crvenilo, svrbež, peckanje ili bol na koži. Ova reakcija obično je uzrokovana izravnim iritantnim učinkom PI na sloj kože kože. Dugoročno ili opetovano izlaganje može pogoršati oštećenje kože, što dovodi do pojačanih lokalnih upalnih reakcija, pa čak i uzrokovanja kontaktnog dermatitisa. Stoga, pri rukovanju PI prahom ili otopinom, potrebno je nositi rukavice otporne na kemikalu (poput gumenih rukavica) kako bi se izbjegao izravan kontakt kože. Ako je slučajno u kontaktu s kožom, odmah isperite kontaktno područje s puno vode i nanesite blagu kremu za njegu kože kako biste ublažili iritaciju.
Nuspojave povezane s kontaktom očima
PI ima značajniji nadražujući učinak na oči i može uzrokovati očne bolesti poput konjuktivitisa i keratisa. Simptomi uključuju crvenilo, oticanje, bol, suzanje, fotofobiju, zamagljeni vid itd. U teškim slučajevima, PI može oštetiti epitelne stanice rožnice, što dovodi do čira rožnice ili stvaranja ožiljaka, što zauzvrat može utjecati na vid. Pri rukovanju PI prahom ili otopinom treba nositi zaštitne naočale ili štitnike za lice kako bi se spriječilo da se prah ili otopina zalijepi u oči. Ako je slučajno u kontaktu s očima, isperite odmah s puno vode ili fiziološke otopine najmanje 15 minuta i potražite medicinsku pomoć što je prije moguće.
Nuspojave povezane s udisanjem
Nakon udisanja PI praha ili čestica aerosola, to može izazvati iritaciju dišnog sustava, što dovodi do simptoma poput kašlja, grlobolje, kratkoća daha i stezanja prsnog koša. Dugoročno ili ponovljeno udisanje može povećati rizik od respiratorne upale, pa čak i imati duge - terminske učinke na funkciju pluća. Pri rukovanju PI prahom to bi se trebalo obaviti u dobro prozračenom okruženju, poput korištenja kapuljače ili lokalnog ispušnog sustava. Nosite masku za prašinu ili respirator kako biste spriječili da se udisavaju čestice praha ili aerosola. Redovito provodite testove funkcija pluća, posebno za osoblje koje je dugo izloženo PI -u.
Nuspojave povezane sa slučajnim gutanjem
Iako se PI uglavnom koristi za in vitro eksperimente, još uvijek se može dogoditi slučajno gutanje, posebno kod djece ili eksperimentalnih životinja. PI može imati poticajni učinak na gastrointestinalnu sluznicu, uzrokujući simptome poput mučnine, povraćanja, bolova u trbuhu i proljeva. U teškim slučajevima mogu se pojaviti kemijski gastritis ili enteritis zbog prekomjernog unosa. Spremite PI prah ili otopinu izvan dosega djece kako biste izbjegli gutanje. Eksperimentalne životinje treba strogo nadzirati kada su izložene PI kako bi se spriječilo slučajno gutanje. Ako se slučajno unese, potražite medicinsku pomoć odmah i primite ciljano liječenje na temelju simptoma.
Popularni tagovi: propidium jodid prah cas 25535-16-4, dobavljači, proizvođači, tvornica, veleprodaja, kupovina, cijena, skupno, na prodaju