Tiazolil plava CAS 298-93-1

Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd. je jedan od najiskusnijih proizvođača i dobavljača tiazolil plave cas 298-93-1 u Kini. Dobrodošli u veleprodaju visokokvalitetnog tiazolil plavog cas 298-93-1 za prodaju ovdje iz naše tvornice. Dobra usluga i razumna cijena su dostupni.

Tiazolil plavo, poznatiji kao MTT (3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolij bromid), krije fascinantnu dvojnost - on je i vitalni alat u staničnoj biologiji i kameleonska kemijska neobičnost. Ovaj žuti kristalni prah prolazi kroz zapanjujuću metamorfozu u živim stanicama: mitohondrijske reduktaze cijepaju njegov tetrazolijev prsten, pretvarajući ga u netopljivi ljubičasti talog formazana - reakcija koja je tako vizualno upečatljiva da je postala zlatni standard za mjerenje održivosti stanica. Ipak, izvan laboratorijske klupe, MTT otkriva više ezoteričnog ponašanja; njegova kristalna struktura oblikuje osebujne uzorke "riblja kost" pod mikroskopom, dok mu njegova redoks svojstva dopuštaju sudjelovanje u egzotičnim fotokemijskim reakcijama kada je izložena određenim valnim duljinama svjetlosti. Zanimljivo, spoj pokazuje rijedak fenomen nazvan "metakromazija" - pojavljivanje različitih boja ovisno o koncentraciji i molekularnom okruženju - svojstvo koje su nekoć iskorištavali tekstilni kemičari za stvaranje "pametnih" boja. Nedavne studije otkrile su njegovu neočekivanu ulogu kao slabog inhibitora određenih enzima respiratornog lanca, nagovještavajući da je ovaj sveprisutni reagens za ispitivanje možda suptilno utjecao na same metaboličke procese za čije proučavanje znanstvenici koriste. Kada se otope u organskim otapalima, MTT otopine pokazuju neobičan učinak gašenja fluorescencije koji je zbunio fizikalne kemičare, sugerirajući složene međumolekularne interakcije koje još uvijek čekaju potpuno objašnjenje.

Tiazolil plavoKemijski naziv je 3-(4,5-dimetil-2-tiazol)-2,5-difeniltetrazolij bromid, skraćeno MTT, koji je važan organski spoj. Otkako je Mosman 1983. prvi put izvijestio o upotrebi bojenja MTT za određivanje rasta i preživljavanja stanica, MTT se naširoko primjenjuje u područjima poput znanosti o životu, medicinskih istraživanja i razvoja lijekova. Slijedi detaljno objašnjenje njegove svrhe:

Primjena u istraživanju stanične biologije

 

MTT je jedna od klasičnih metoda za određivanje stanične proliferacije. Tijekom stanične kulture, dehidrogenaze kao što je sukcinat dehidrogenaza u mitohondrijima živih stanica mogu reducirati egzogeni MTT u netopivi plavoljubičasti kristalni formazan, koji se taloži u stanici. Mrtvim stanicama nedostaje ta redukcijska sposobnost i stoga ne proizvode formazan. Otapanjem formazana u stanicama i mjerenjem njegove vrijednosti apsorpcije svjetla na određenim valnim duljinama (kao što je 490 nm ili 562 nm) pomoću čitača enzim-imunosorbentnog testa (ELISA), broj živih stanica može se neizravno odraziti. Unutar određenog raspona broja stanica, količina formiranih kristala MTT proporcionalna je broju stanica, pa se proliferacija stanica može odrediti na temelju izmjerene vrijednosti apsorbancije (OD vrijednost).

Primjena u istraživanju stanične biologije

 

MTT se također može koristiti za određivanje toksičnosti lijekova ili drugih metoda liječenja (kao što je zračenje) na kultiviranim stanicama in vitro. Usporedbom vrijednosti OD terapijske skupine i kontrolne skupine može se procijeniti učinak lijekova ili metoda liječenja na aktivnost stanica. Što je veća OD vrijednost, to je jača stanična aktivnost; Naprotiv, to ukazuje da je slabija aktivnost stanica ili veća toksičnost stanica. Ova metoda ima široku primjenu u probiru lijekova, toksikološkim istraživanjima i drugim područjima. Iako se MTT uglavnom koristi za mjerenje stanične proliferacije i citotoksičnosti, u nekim slučajevima može se koristiti i kao pomoć u proučavanju stanične apoptoze. Tijekom procesa stanične apoptoze, aktivnost enzima unutar stanice se mijenja, što može utjecati na reducirajuću sposobnost MTT-a. Usporedbom razlike u vrijednostima OD između apoptotskih i normalnih stanica može se preliminarno utvrditi pojava stanične apoptoze. Međutim, valja napomenuti da MTT nije specijalizirana metoda za detekciju stanične apoptoze, te je njezine rezultate potrebno sveobuhvatno analizirati zajedno s drugim metodama detekcije apoptoze.

Primjena u razvoju lijekova

 

U procesu razvoja lijekova, MTT test često je korištena visoko{0}}metoda probira lijekova. Zajedničkom inkubacijom ispitivanog lijeka sa stanicama i korištenjem MTT testa za mjerenje promjena u staničnoj aktivnosti, potencijalne aktivne molekule lijeka mogu se brzo pregledati. Prednosti ove metode su jednostavno rukovanje, pouzdani rezultati i visoka propusnost, te ima važnu primjenjivu vrijednost u ranoj fazi razvoja lijeka. MTT test se također može koristiti za proučavanje mehanizma djelovanja lijekova. Usporedbom promjena u staničnoj aktivnosti u različitim uvjetima liječenja lijekovima može se preliminarno utvrditi utjecaj lijekova na procese poput stanične proliferacije i apoptoze. Kombinacijom drugih tehnika molekularne biologije kao što su Western blot i protočna citometrija, mete i signalni putovi lijekova mogu se dodatno otkriti. U procjeni sigurnosti lijekova, MTT test se može koristiti za procjenu toksičnih učinaka lijekova na stanice. Mjerenjem promjena OD vrijednosti stanica nakon liječenja lijekom moguće je utvrditi ima li lijek citotoksičnost i jačinu toksičnosti. Ovo je od velike važnosti za usmjeravanje pretkliničkih istraživanja i kliničke primjene lijekova.

Primjena MTT-a u drugim područjima

 

U imunološkim istraživanjima, MTT test se može koristiti za određivanje sposobnosti proliferacije limfocita. Zajedničkom inkubacijom limfocita s antigenima ili imunostimulansima i mjerenjem promjena u staničnoj aktivnosti korištenjem MTT testa, može se procijeniti sposobnost imunološkog odgovora limfocita. Ova metoda ima široku primjenu u razvoju cjepiva, imunoterapiji i drugim područjima. U onkološkim istraživanjima, MTT test se može koristiti za određivanje aktivnosti proliferacije i osjetljivosti tumorskih stanica na lijekove. Usporedbom promjena u vrijednostima OD tumorskih stanica pod različitim uvjetima liječenja lijekovima, molekule lijekova s ​​inhibicijskim učincima na tumorske stanice mogu se pregledati i mogu se procijeniti njihovi anti-tumorski učinci. Ovo je od velike važnosti za usmjeravanje kliničkog liječenja tumora. U toksikološkim istraživanjima okoliša, MTT test se može koristiti za procjenu toksičnih učinaka zagađivača okoliša na stanice. Zajedničkom inkubacijom stanica s različitim koncentracijama zagađivača i mjerenjem promjena u staničnoj aktivnosti korištenjem MTT testa, može se odrediti toksičnost i mehanizam djelovanja zagađivača. To je od velikog značaja za procjenu ekoloških rizika onečišćivača okoliša i formuliranje politike zaštite okoliša. 

Eksperimentalni koracitiazolil plavometoda:

1: Tripsin probavlja stanice logaritamske faze, centrifugira i skuplja ih nakon završetka kako bi se napravila stanična suspenzija, i prilagođava svoju koncentraciju na 5-10 pomoću broja stanica × 104/ml. Za početnike je potrebno postići da stanice dosegnu 5-10 × 104/ml često ne znaju odakle početi. Ovdje sam da vam pružim jednostavnu metodu za početno određivanje broja ćelija.

Uzmimo 25 cm2 koji se obično koristi za kulturu stanica kao primjer:

1) Gustoća stanica je oko 80%~90% (slika ispod prikazuje približno stanje stanica pri gustoći 80%~90%). Nakon digestije i centrifugiranja, uklonite supernatant i dodajte 3 ml medija za miješanje.

2) Uzmite novu sterilnu epruvetu za centrifugiranje od 15 ml (za sljedeći korak inokulacije ploče s 96 jažica) i napunite je s oko 9 ml medija

3) Uzmite 1 ml od 3 ml stanične suspenzije pripremljene u prvom koraku, dodajte u gornju epruvetu i prebrojite stanice nakon miješanja. U ovom trenutku, općenito je 5-10 ili manje × 104/ml, što je ekvivalentno 5-10 stanica po stanici u 4 stanice ploče za brojanje stanica (pogledajte donju sliku); Ako koncentracija nije dovoljna, stanična suspenzija će se dodati prema rezultatu brojanja, a svaka kap će se izračunati kao 50 ul.

4) Broj ćelija treba prilagoditi u skladu s različitim svrhama pokusa. Na primjer, u općem eksperimentu stanične proliferacije može se koristiti 2000 stanica po jažici (ekvivalentno gustoći stanične suspenzije od 2 × 104/ml), 5000 do 10000 stanica po jažici (ekvivalentno gustoći stanične suspenzije od 5 × 104/ml). Osim toga, broj stanica također treba odrediti prema njihovim vlastitim karakteristikama, kao što je brzina rasta. Na primjer, gustoća stanica koje rastu brže može biti nešto manja.

2. Nakon što pripremite suspenziju stanica, lagano je promiješajte i dodajte 100 ul u svaku rupicu, tako da gustoća stanica koje se testiraju bude 5000-10000/rupici (rub rupice je ispunjen sterilnim PBS-om).

L Napomena: Budući da će se stanice nastaviti taložiti nakon miješanja, potrebno je više puta miješati tijekom procesa inokulacije, kao što je miješanje svakih šest rupa, kako bi se osiguralo da je gustoća stanica inokulacije potpuno ista između rupa, što je presudno za rezultate MTT.

3. Stavite inokuliranu ploču stanične kulture u inkubator za uzgoj sve dok stanični monosloj ne bude prekriven dnom rupice (ravna ploča s 96 rupica) i dodajte lijek s gradijentom koncentracije. U principu, lijek se može dodati nakon što je ćelija pričvršćena na zid, ili dva sata, ili pola dana, ali često lijek dodajemo poslijepodne prethodnog dana, te sljedećeg jutra. Općenito, postavlja se 5-7 gradijenata, 100 ul po rupi i 3-5 više rupa. Preporuča se postaviti 6, inače je teško prikazati stvarno stanje. Sljedeća slika može se koristiti kao referentni korak za ploču s 96 rupa.

L Za doziranje, neki ljudi izravno dodaju lijekove u ploče s 96 jažica u različitim volumenima kako bi formirali koncentracijski gradijent. Ali mislim da bismo trebali pokušati pomiješati različite koncentracije lijekova u EP epruveti, zatim ukloniti supernatant kulture iz ploče s 96 jažica (koji se može usisati pištoljem za pražnjenje) i dodati 100 ul medija kulture koji sadrži različite koncentracije lijekova, što može osigurati točnost koncentracije lijeka. Osim toga, treba napomenuti da ako se koristi ova metoda, nemojte usisavati svu otopinu kulture s 96 jažica prije dodavanja lijeka. Uzorke trebate dodati odmah nakon usisavanja dijela kako biste izbjegli smrt stanica zbog sušenja ploče s 96 jažica.

Inkubirajte s 4,5% CO2 na 37 stupnjeva 16-48 sati i promatrajte učinak lijeka pod invertnim mikroskopom. Sljedeća slika prikazuje tipični gradijent citotoksičnosti lijeka.

4. Dodajte 10 ul MTT otopine (5 mg/ml, tj. . 0.5% MTT) u svaku jažicu i nastavite s kulturom 4 sata. Ako lijek može reagirati satiazolil plavootopina kulture može se baciti nakon centrifugiranja, a otopina kulture koja sadrži MTT može se dodati nakon ispiranja s PBS 2-3 puta.

5. Zaustavite kulturu i pripremite se za otapanje i kristalizaciju.

Tiazolil plavo, čije je kinesko ime metilno plavo, važan je organski spoj koji se široko koristi u medicini, biologiji i kemiji. u medicini se često koristi za liječenje trovanja nitritima, trovanja cijanidom itd., a također se koristi u dijagnostici i pomoćnom liječenju nekih bolesti; u biološkim istraživanjima može se koristiti kao sredstvo za bojenje za označavanje stanica ili tkiva. Međutim, kao i mnogi drugi lijekovi, metilensko plavo također može imati niz nuspojava tijekom upotrebe:

Nuspojave probavnog sustava

Mučnina i povraćanje jedna su od uobičajenih nuspojava metilenskog modrila u probavnom sustavu. Kada metilensko modrilo uđe u tijelo, može stimulirati gastrointestinalnu sluznicu, uzrokujući mučninu, pa čak i povraćanje u teškim slučajevima. Ovaj simptom je izraženiji kada je brzina intravenske injekcije prebrza ili je doza prevelika. Na primjer, u nekim kliničkim slučajevima pacijenti mogu doživjeti značajnu mučninu i povraćanje ubrzo nakon brze intravenske injekcije metilenskog modrila, što utječe na njihovu udobnost i iskustvo liječenja. Neki pacijenti mogu osjetiti bolove u trbuhu nakon primjene metilenskog modrila, a stupanj boli može varirati ovisno o individualnim razlikama, u rasponu od blage nelagode do jače boli.

Istodobno, može biti popraćen i proljevom, koji može biti posljedica utjecaja metilenskog modrila na peristaltiku crijeva i probavne funkcije, što dovodi do abnormalnog pokreta crijeva i promjena u lučenju probavne tekućine. Dugotrajna ili česta pojava bolova u trbuhu i proljeva ne samo da utječe na pacijentovu apsorpciju hranjivih tvari i fizičko zdravlje, već može dovesti i do drugih komplikacija.

Nuspojave mokraćnog sustava

Nakon upotrebe metilenskog modrila, boja urina postaje plava, što je uzrokovano izlučivanjem metilenskog modrila i njegovih metabolita u mokraću putem bubrega. Općenito, ova promjena boje urina je privremena i neće imati ozbiljan utjecaj na fizičko zdravlje. Ali u nekim posebnim slučajevima, kao što su pacijenti s bolestima mokraćnog sustava, promjene boje urina mogu ometati dijagnozu bolesti, pa liječnici moraju provesti sveobuhvatnu analizu na temelju drugih pokazatelja pregleda. Tijekom mokrenja neki pacijenti mogu osjetiti peckanje na otvoru uretre.

 

To može biti posljedica stimulirajućeg djelovanja metilenskog modrila na sluznicu uretre, osobito kada je koncentracija mokraće visoka ili se sluznica uretre trlja tijekom mokrenja, peckanje će biti izraženije. Ovaj simptom može uzrokovati određenu nelagodu pacijentima i utjecati na njihov svakodnevni život.

Neurološke nuspojave

Vrtoglavica i glavobolja česte su neurološke nuspojave metilenskog modrila. Nakon uporabe metilenskog modrila, pacijenti mogu osjetiti vrtoglavicu i dezorijentaciju u glavi ili osjetiti nelagodu poput otekline i boli u glavi. Ovaj simptom može utjecati na pacijentovu pažnju i sposobnost razmišljanja te smanjiti radnu i životnu učinkovitost. Pojava vrtoglavice i glavobolje može biti povezana s učincima metilenskog modrila na moždane krvne žile i živce, a specifični mehanizam tek treba dodatno istražiti. U rijetkim slučajevima metilensko modrilo može uzrokovati poremećaje svijesti kao što su pospanost, koma i sl.

To je obično zbog pretjerane upotrebe metilenskog modrila ili pacijenata koji su preosjetljivi na lijek, što uzrokuje ozbiljnu inhibiciju središnjeg živčanog sustava. Poremećaji svijesti ozbiljna su nuspojava koja može ugroziti životnu sigurnost bolesnika i zahtijeva hitno hitno liječenje.

1.Koja je upotreba tiazolil plavog tetrazolijevog bromida?

Thiazolyl Blue Tetrazolium Blue (MTT) može se koristiti za mjerenje stanične proliferacije. MTT proizvodi žućkastu otopinu koju mitohondrijske dehidrogenaze živih stanica pretvaraju u tamnoplavi, u vodi-netopivi MTT formazan.

2. Je li Thiazolyl Blue sigurno čuvati?

Temperaturni uvjeti: Zatvorite prašak i pohranite ga u hladnjak na -20 stupnjeva za zamrzavanje, što može učinkovito produžiti rok trajanja (obično 1-2 godine); za kratkotrajno skladištenje (unutar 1 mjeseca), može se privremeno čuvati u uvjetima hlađenja od 4 stupnja.

Zahtjevi za -otpornost na svjetlost i vlagu: MTT prah je-osjetljiv na svjetlost i mora se čuvati u smeđim bocama reagensa ili prozirnim bocama omotanim limenom folijom. U međuvremenu treba dodati sredstva za sušenje (npr. silika gel) kako bi se spriječilo da prah upije vlagu i stvrdne se.

3. Hoće li se boja Thiazolyl Blue promijeniti?

Kada otopina pokazuje plavi ljubičasti talog ili potamni, to znači da je oksidirana i da se ne može dalje koristiti.
Izbjegavajte stavljanje otopine na sobnu temperaturu ili u osvijetljeno okruženje, jer može brzo pokvariti.

Popularni tagovi: tiazolil plava cas 298-93-1, dobavljači, proizvođači, tvornica, veleprodaja, kupovina, cijena, rasuto, na prodaju